I det här nya kapitlet i den episka sagan 300 flyttar kampen för herravälde till ett nytt slagfält: havet. Grekiska generalen Themistocles ställs mot invaderande persiska trupper som tillber guden och kungen Xerxes och leds av den hämndlystna befälhavaren Artemisia. För att bekämpa dem måste Themistocles ena Grekland och leda anfallet som ändrar krigets förlopp.